서 론
현대사회가 발달함에 따라 삶의 질이 향상되었으며, 제품에 대한 성분을 꼼꼼하게 따지고 인체에 좀 더 안전한 것을 선호하는 소비자들이 증가하고 있다. 최근에는 제품에 대한 소재로 천연소재나 자연친화적 또는 친환경적인 소재 등에 대하여 많은 연구가 진행되고 있다[1]. 특히, 인체의 일부분인 구강은 외부와 직접 연결되어 있기 때문에 미생물의 침입이 불가피하고, 영양적 또는 환경적으로 세균이 증식하기에 적합하여 약 500여 종 이상의 세균이 치아, 잇몸, 혀 및 구강 점막 등에 존재한다. 그러므로, 질병의 예방과 치료를 위해 식용 가능하고 항균 활성을 지닌 제품이 절실히 필요한 실정이다[2]. 구강 내 질환은 정상 세균총 중 특정 미생물이 증식하면서 발병되는 질환으로 치아우식증, 치은염 및 치주염 등이 구강 내 존재하는 세균에 의한 감염인 것으로 알려져 있다. 구강 내 세균 중 Streptococcus mutans와 Streptococcus sobrinus는 치아우식증의 대표적인 원인균이며, 특히 S. mutans는 치면세균막을 형성하여 치석을 생성시킴으로써 치아의 탈회 유발 및 치아우식 등을 유발시킨다[3,4]. 그리고 치주질환을 일으키는 구강세균으로는 Porphyromonas gingivalis, Aggregatibacter actinomycetemcomitans 및 Fusobacterium nucleatum 등이 알려져 있다[5,6]. 구강질환 예방과 치료를 위하여 지금까지 항생제, 불소함유제 및 클로로헥시딘(chlorohexidine) 등을 이용한 연구가 꾸준히 진행되었지만[7,8], 내성유발과 치아변색 등의 문제점들이 발견됨에 따라 이를 포함한 다양한 부작용으로부터 안전한 천연소재 탐구 관련 분야가 많은 관심을 받고 있다[9,10].
우리나라에서 식용과 약용으로 쓰이는 버섯은 진균류에 속하며, 대부분 담자균류와 자낭균류의 일종이다. 향과 식감이 뛰어나고 각종 영양소, 예를 들어 탄수화물, 단백질, 지질, 무기질 및 비타민 등을 함유하고 있어 고영양 재료로 일상에서 꾸준히 이용되어 왔다[11]. 현재까지 표고버섯의 항균 활성, 상황버섯의 항산화 활성, 송이버섯의 혈전 용해 활성, 표고버섯의 면역증강 및 새송이버섯의 항염증 활성 등 다양한 버섯의 생리활성이 보고됨에 따라 각종 구강 관련 기능성 제품에 대한 천연 소재의 후보 물질로 대두되고 있다[11-13]. 싸리버섯(Ramaria botrytis Fr. Rick)은 싸리버섯과(Ramariceae)로서, 주로 동아시아, 유럽, 북미 그리고 우리나라에 널리 분포하며, 장마가 끝난 직후부터 초가을까지 야산에서 대량으로 생장하는 버섯이다[14-16]. 싸리버섯으로부터 알려진 주요 아미노산 성분은 아스파틱산, 시스테인 및 히스티딘 등이고, 유기산으로는 숙신산(succinic acid)이 가장 많이 포함되어 있으며, 말산(malic acid)과 구연산(citric acid) 등이 존재한다. 유리당은 주로 포도당(glucose)과 자당(sucrose)이 차지하며, 무기물 검출과 정량 연구 결과, 영양소 중에 칼륨이 가장 많고 칼슘이 일반 식물과 비교하여 매우 적음이 확인되었다[17]. 현재까지 보고된 싸리버섯의 생리활성으로는 메탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획물에서 밝혀진 돌연변이 억제 효과와 HT29 결장암세포 성장 억제 효과[18], 메탄올 추출물에서 증명된 항산화 활성과 항산화계 효소 증가로 인한 간 손상 보호 효과[19] 및 마우스를 통한 간 손상 억제 효과와 간 독성을 해독하기 위한 cytochrome P450 1A1 isozyme 단백질의 감소[16] 등이 알려져 있다. 또한 싸리버섯의 일종인 붉은 싸리버섯(Ramaria formosa Fr.)에서는 메탄올 추출을 통해 주요 성분인 4-hexyl-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3- furanacetic acid 성분이 알려져 있고 그들의 변비 완화 효과 등이 증명되었다[15].
구강미생물에 대한 항균 활성이 연구된 천연물로는 콩[2], 칡[20], 지의류[21] 및 매실[22] 등이 있으나, 아직까지 국내에서는 다양한 종류의 천연물에 대한 연구가 상당히 미비한 실정이다. 특히, 버섯의 경우에는 표고버섯의 아세톤 추출물과 에틸아세테이트 추출물을 이용하여 구강미생물 5종에 대한 증식 억제 효과를 보고한 일부 자료만이 알려져 있다[13]. 또한, 싸리버섯에 대한 구강미생물의 항균 활성은 현재까지 연구된 바가 전무하기 때문에, 본 연구에서는 아세톤, 에탄올 및 에틸아세테이트 등 3가지 용매로 싸리버섯으로부터 용매추출하여 치아우식증과 치주질환 원인균인 Streptococcus, Actinomyces 및 Aggregatibacter 등 총 10종의 구강세균에 대한 항균 효과를 확인함으로써 항균 관련 구강제품에 적용될 후보 천연소재로써의 가능성을 탐색하고자 한다.
연구방법
1. 싸리버섯의 용매추출물 제조
싸리버섯은 강원도 양양군 소재의 산과 바다농장에서 냉동 싸리버섯을 구입하여 사용하였다. 자연 건조하여 분쇄한 싸리버섯 50.00 g에 유기용매(아세톤, 에틸아세테이트 및 에탄올) 400 ml를 각각 첨가하여 상온에서 3일 동안 추출하였다. 각각의 추출액을 3번 감압여과(ADVANTEC No. 2 Advantec MFS, Inc., Tokyo, Japan) 한 후, 회전진공증발기(rotary evaporator, EYELA A-1000S, Tokyo Rikakikai Co, Tokyo, Japan)로 농축하여 추출물을 확보하였으며, 추출용매로는 99.50% 아세톤, 99.50% 에탄올 및 99.00% 에틸아세테이트(Daejung Chemicals & Metals, Siheung, Korea) 등을 사용하였다. 각각의 추출물은 200.00 mg/ml의 농도로 DMSO에 용해시켜 4°C에 보관하였으며, 필요에 따라 희석하면서 실험에 사용하였다.
2. 실험 구강균주와 배지
실험에 사용된 구강균주는 총 10종으로 그람양성간균인 Staphylococcus aureus 외 8종과 그람음성균인 Aggregatibacter actinomycetemcomitans 1종 등을 생물자원센터(Korean Collection for Type Cultures, KCTC)로부터 분양 받아 사용하였다. S. aureus, S. anginosus, S. criceti, S. mutans, S. ratti, S. sanguinis 및 S. sobrinus 등은 Brain-Heart Infusion (BHI, Difco, Detroit, MI, USA) 배지에, A. israelii, A. viscosus 및 A. actinomycetemcomitans 등은 Trypticase Soy Broth (TSB, BD Co., USA) 배지에 접종하여 24시간 동안 37°C 혐기성배양기(5% CO2)에서 배양하였다<Table 1>.
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Table 1. List of strains used for antibacterial experiments 
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| BHI: Brain-Heart Infusion, TSB: Trypticase Soy Broth | |
3. 싸리버섯 용매추출물의 항균력 측정
싸리버섯 추출물의 항균력은 디스크 확산법을 이용하여 측정하였다[23]. 각 시험 구강균주를 각각의 조건에 맞는 액체 배지에 접종 후 37°C에서 24시간 배양하여 활성화시키고 0.5 McFarland 표준탁도(약 1.00×108 CFU/ml)로 맞추어 각각의 평판 배지에 멸균된 면봉을 이용하여 균일하게 도포하였다. 멸균된 filter paper disc (diameter 6 mm, Whatman AA disc, Whatman International, St. Louis, MO, USA)에 추출물을 30 μl (6.00 mg/disc)농도로 흡수 및 건조시켜 평판 배지 위에 올려놓는다. 그리고 37°C 혐기성배양기(incubator)에서 24시간 동안 배양시키면서, paper disc 주위에 생성된 억제환(inhibition zone)의 크기를 vernier caliper (0∼150 mm, color world, China)로 측정하는 방법으로 모든 추출물에 대한 항균력을 비교·분석하였다. 실험을 3번 반복하여 평균값과 표준편차로 나타냈으며, 100.00 μg/ml ampicillin을 양성대조군으로 사용하였다[24].
4. 최소생육저해농도(MIC) 측정
디스크 확산법으로부터 얻은 항균활성 관련 결과를 바탕으로 아세톤, 에틸아세테이트 및 에탄올 추출물 중 항균력이 가장 높게 확인된 에틸아세테이트 추출물만을 사용하여 각 구강균주에 대한 최소생육저해농도(MIC) 값을 액체배지희석법(broth dilution method)으로 측정하였다. 96 well plate에 최종농도가 0.12 mg/ml에서 15.00 mg/ml가 되도록 멸균된 증류수를 이용하여 단계별로 추출물을 희석시켰다. 희석된 추출물 60 μl, 각 구강균주 100 μl 및 배지 40 μl를 첨가하였다. 각 구강균주를 활성화시킨 후, 균의 농도를 5.00×105 CFU/ml이 되도록 희석하여 사용하였다. 37°C 혐기성배양기에서 24시간 동안 배양시킨 후, 600 nm에서 흡광도를 측정하여 균의 생육이 나타나지 않는 추출물의 농도를 MIC로 결정하였다.
5. 구강미생물 생육저해곡선
구강세균에 대한 에틸아세테이트 추출물의 농도별 및 시간경과별 생육저해정도를 조사하였으며, 위에서 설명한 최소생육저해농도 측정 방법과 동일하게 진행하였다. 싸리버섯 에틸아세테이트 추출물의 MIC 값으로 얻어진 15.00 mg/ml, 7.50 mg/ml, 3.75 mg/ml 및 1.88 mg/ml, 0.12 mg/ml 농도로 추출물을 단계별로 희석하여 첨가하였다. 36시간까지 배양하면서 시간별로(0, 2, 4, 6, 10, 12, 24 및 36 hr) 600 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 추출물을 포함하지 않은 용액(DMSO 첨가)을 음성대조군으로 사용하였다.
6. 구강미생물의 생육저해율 측정
싸리버섯 추출물이 구강세균의 생육에 미치는 생육저해율 측정은 싸리버섯 추출물을 3.75 mg/ml 농도로 주입하였으며, 위의 최소생육저해농도 측정방법과 동일하게 측정하였다. 37°C에서 24시간 배양한 후, 600 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 다음 식을 사용하여 생육저해율을 조사하였다.
Inhibitory rate(%) = { 1 - (treatment-treatment blank)/(control-control blank) } × 100
7. 통계처리
본 연구의 통계처리는 SPSS Statistics 23 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA)을 이용한 분산분석(ANOVA) 방법으로 비교하였으며, Duncan’s multiple range test (α=0.05)에 따라 유의성을 검증하였다. 모든 실험 결과는 3회 반복적으로 수행하여 평균±표준편차로 나타내었다.
연구결과
1. 싸리버섯 용매추출물의 수율
싸리버섯을 건조 분쇄 후, 아세톤, 에탄올 및 에틸아세테이트 등으로 용매추출하여 확보한 고형물의 함량을 각 용매별 수율로 계산하였다<Table 2>. 추출 수율은 에틸아세테이트 추출물이 8.93 %로 다른 용매추출물과 비교하였을 때 가장 높은 수율을 보였으며, 다음으로 아세톤(6.30%)과 에탄올(4.01%) 순으로 나타났다.
2. 싸리버섯 용매추출물의 항균력
싸리버섯의 용매별 추출물의 항균활성을 디스크 확산법으로 조사하였다<Fig. 1>. 아세톤과 에틸아세테이트 추출물은 10종의 구강균주 모두에 대하여 항균효과를 나타내었고, 에탄올 추출물의 경우는 S. anginosus, S. mutans 및 S. sanguinis 등을 제외한 나머지 구강균주 모두에서 다소 약한 항균활성을 보였다. 아세톤 추출물은 S. criceti와 S. ratti에서 각각 8.23 mm와 8.59 mm 등으로 다른 구강균주들에 비해 높은 활성을 보였으며, 에틸아세테이트 추출물은 모든 구강균주에서 가장 강한 항균활성을 확인하였다. S. anginosus, S. criceti, S. ratti 및 A. actinomycetemcomitans 등에서 각각 8.19 mm, 8.66 mm, 8.98 mm 및 9.05 mm의 억제환을 보이는 것처럼 다른 용매추출물에 비해 유의적으로 월등히 높은 항균활성을 보였다(p<0.05). 대부분의 모든 구강균주에서 에틸아세테이트 > 아세톤 > 에탄올 추출물 순으로 항균활성이 나타났으며, 일부 A. israelii과 A. viscosus 등에서는 에틸아세테이트 > 에탄올 > 아세톤 추출물 순으로 항균활성을 보였으나, 유의적 차이를 나타내지는 않았다(p>0.05).
Fig. 1.
Antimicrobial activity of extracts from Ramaria botrytis by disc diffusion. The results represent the Mean±SD of values obtained from three independent experiments. Mean with different letter (a-b) on the bars in the same bacteria are significantly different by Duncan's multiple comparison (p<0.05)
3. 싸리버섯 용매추출물의 최소생육저해농도(MIC)
10종의 구강균주에 대해서 다른 용매추출물에 비해 강한 항균활성을 보인 에틸아세테이트 추출물의 최소생육저해농도를 측정하였다<Table 3>. 싸리버섯 에틸아세테이트 추출물은 S. aureus와 S. mutans에서 각각 15.00 mg/ml이였으며, S. anginosus, S. criceti, S. ratti, S. sanguinis 및 A. viscosus 등에서는 각각 7.50 mg/ml의 MIC를 나타내었다. 또한 S. sobrinus와 A. actinomycetemcomitans 에서는 7.50 mg/ml와 15.00 mg/ml 사이의 MIC 값을 보였으며, 특히 A. israelii에서는 3.75 mg/ml로 가장 낮은 MIC를 확인하였다.
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Table 3. Minimum inhibitory concentration (MIC) of ethyl acetate extracts from Ramaria botrytis against oral pathogens 
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4. 구강미생물의 생육저해율
10종 구강균주를 대상으로 가장 강한 활성을 나타낸 싸리버섯 에틸아세테이트 추출물을 3.75 mg/ml 농도로 사용하여 측정한 생육저해율 결과는 다음과 같다<Fig. 2>. S. aureus와 S. sobrinus의 경우 생육저해율이 너무 낮아 그림에서 제외하였다. 24시간 동안 배양한 경우, 싸리버섯 에틸아세테이트 추출물이 첨가된 구강균주는 추출물을 첨가하지 않은 음성대조군에 비하여 A. israelii과 A. viscosus에 대한 생육저해율이 각각 93.70%와 76.50% 정도 유의적으로 높은 결과를 보였다(p<0.05). 또한, A. actinomycetemcomitans에 대한 생육저해율이 56.80%로 A. israelii와 A. viscosus를 제외한 나머지 그람 양성균보다 높은 결과를 나타냈으며, S. mutans와 S. sanguinis에 대한 생육저해율은 각각 18.40%와 26.70%로 상당히 낮게 확인되었다.
Fig. 2.
Inhibitory effect of ethyl acetate extract from Ramaria botrytis against oral pathogens for 24 hr at 37°C. The results represent the Mean±SD of values obtained from three independent experiments. Mean with different letter (a-d) on the bars in the same bacteria are significantly different by Duncan's multiple comparison (p<0.05)
5. 구강미생물의 생육저해곡선
싸리버섯의 에틸아세테이트 추출물을 첨가한 후, 10종 구강균주에 대하여 배양시간(0∼36 hr)과 추출물 농도에 따라 균의 증식에 미치는 영향을 조사한 결과는 다음과 같다<Fig. 3>. MIC 측정결과, 싸리버섯의 에틸아세테이트 추출물은 모든 구강균주에서 3.75∼15.00 mg/ml의 MIC 값을 보여주었기 때문에, 이를 바탕으로 MIC보다 낮은 농도인 0.12, 1.88, 3.75, 7.50 및 15.00 mg/ml 등의 농도별로 싸리버섯 에틸아세테이트 추출물을 첨가하면서 10종 구강균주에 대한 생육저해곡선을 측정하였다. 추출물을 첨가하지 않은 음성대조군에서 2시간 이후, 4∼6 시간까지 균의 성장이 빠르게 증가하였으나, 싸리버섯 에틸아세테이트 추출물을 0.12 mg/ml로 첨가하였을 경우에는 4시간까지 균의 증식이 억제되다가 12시간까지 균이 완만하게 증식되었으며, 그 이후에는 균의 증식이 활발히 진행되었다. 1.88∼7.50 mg/ml의 농도에서는 대부분의 구강균주의 경우, 12시간까지 균의 생육이 억제되었으며, 12시간 이후 음성대조군에 비해 균의 증식이 활발히 진행되었다. 결과적으로, 농도가 커질수록 균의 증식이 억제되는 시간이 증가하였으며, 균의 증식 속도가 느려지는 것을 확인할 수 있었다. 특히, S. criceti, S. ratti 및 S. anginosus 등은 7.50 mg/ml의 경우에서 24시간까지 균의 증식이 지연되는 결과를 보여주었으며, 또한 농도가 가장 높은 15.00 mg/ml에서는 10종의 모든 구강세균에 대한 36시간 생육기간동안 균의 증식이 완전히 억제되는 것을 확인할 수 있었다.
총괄 및 고안
현대 사회는 생활수준의 향상으로 구강 건강에 대한 관심이 높아졌으나, 식생활의 변화로 인해 구강질환은 해마다 증가되고 있는 추세이다. 구강질환의 원인으로는 개체, 병원체 및 환경 등 3가지의 발병요인이 복합적으로 작용하여 발생하며, 통증, 섭식 기능 장애 및 구취 혹은 치아 상실을 유발하는 치아우식증과 치주질환 등이 대표적인 구강질환에 해당된다. 구강은 미생물이 서식하는데 적합한 환경으로 다양한 세균이 존재함으로써 구강 내 질환을 유발시킨다. 치아우식증은 치면세균막 내 세균, 음식물 및 타액 등의 상호작용에 의해 발생되는 세균감염성 질환으로 치아 표면의 세균막 내 존재하는 구강세균이 가장 주된 요인으로 알려져 있으며, Streptococcus와 Actinomyces 속에 해당되는 균들이 원인균에 해당된다. 치주질환은 치주조직의 파괴와 골흡수를 발생시키는 세균감염성 질환으로 Aggregatibacter actinomycetemcomitans와 Porphyromonas gingivalis 등이 원인균이다. 치아우식증과 치주질환 등 구강질환을 예방하고 구강세균의 성장을 억제하기 위해서 클로로헥시딘과 같은 항생제 등을 사용하지만, 균주 돌연변이에 의한 내성 및 치아의 착색과 같은 부작용이 증가함에 따라 이를 대체하기 위한 천연항균물질에 관심이 많아지고 있다. 폴리페놀과 플라보노이드는 구강균주의 성장을 억제하는 주된 생리활성물질로 알려져 있으며, 특히 (-)-epigallocatechin gallate (EGCg)와 같은 폴리페놀이 균의 성장을 억제한다고 보고되었다[25].
버섯은 탄수화물, 단백질, 지질, 무기질 및 비타민 등 풍부한 영양소를 함유하고 있으며, 항산화, 항균 및 항암 등 우수한 생리활성을 나타내는 것으로 알려져 있다. 또한 일부 버섯 관련 구강세균에 대한 항균활성도 보고된바 있다. 박 등[26] 은 만가닥버섯의 S. mutans에 대한 항균활성을 보고하였으며, 한 등[13] 은 표고버섯의 에틸아세테이트 추출물이 S. aureus, S. sanguinis, A. actinomycetem-comitans 및 A. viscosus 등에 우수한 항균활성이 있다고 보고하였다. Lien 등[27]은 장지버섯의 95% 에탄올, 클로로포름 및 에틸아세테이트 추출물이 P. gingivalis와 S. mutans의 생장을 억제한다고 보고하였다.
이에 본 연구에서는 치아우식증과 치주질환 원인균에 대한 싸리버섯의 항균활성을 알아보고자 싸리버섯을 아세톤, 에탄올 및 에틸아세테이트 등 3종의 용매로 추출하였으며, S. mutans, S. sobrinus, S. aureus, S. sanguinis, S criceti, S. ratti, S. anginosus, A. actinomycetemcomitans, A. viscosus 및 A. israelii 등 10종의 구강세균에 대한 항균활성능력과 최소억제농도를 측정하였다. 또한, 생장저해곡선을 확인함으로써 싸리버섯 추출물이 10종의 구강세균의 생장에 미치는 영향을 조사하였다. 싸리버섯의 에틸아세테이트 추출물은 10종 구강세균 모두에서 항균활성을 나타내었고, 아세톤 추출물은 에틸아세테이트 추출물의 항균활성에 비해 다소 약하지만 S. mutans를 제외한 나머지 모든 구강균주에서 항균효과를 보였다. 에탄올 추출물은 S. anginosus, S. mutans 및 S. sobrinus 등에서 활성을 보이지 않았으나, A. viscosus에 대한 활성에서만 다른 모든 구강균주에 비해 다소 높게 확인되었다. 에틸아세테이트를 이용한 표고버섯 추출물이 아세톤 표고버섯 추출물보다 구강세균에 대해 높은 항균활성을 보인 선행연구[13] 에서와 동일하게, 본 연구에서도 싸리버섯의 구강세균에 대한 항균효과를 높이는데 에틸아세테이트가 가장 적합한 용매임을 확인할 수 있었다. MIC 측정결과, 싸리버섯의 에틸아세테이트 추출물은 A. israelii의 경우, 3.75 mg/ml인 것을 제외하고 나머지 모든 구강균주에 대해서 7.50∼15.00 mg/ml의 높은 MIC 값을 나타내었다. 싸리버섯의 에틸아세테이트 추출물을 첨가하였을 경우, 모든 농도에서 12시간까지 균의 생육을 억제하였으며, 또한 10종의 구강균주에 대하여 15.00 mg/ml의 추출물을 첨가한 경우에는 균의 생육 기간 동안 균의 증식이 발생하지 않고 사멸되었다. 결과적으로, 본 연구에서는 싸리버섯 추출물이 S. aureus, S. anginosus, S. criceti, S. mutans, S. ratti, S. sanguinis, S. sobrinus, A. israelii, A. viscosus 및 A. actinomycetemcomitans 등에 항균활성을 보였으며, 특히, A. viscosus에 대해 항균활성이 높게 나타났다. 따라서 치아우식증 뿐만 아니라 치주질환을 유발하는 구강균주에 대한 싸리버섯 추출물의 항균효과를 확인할 수 있었으며, 특히 싸리버섯에 대해 에틸아세테이트가 아세톤 및 에탄올 보다 구강세균의 성장을 억제하는데 효과적인 용매로서 더욱 적합하다는 것을 확인할 수 있었다. 버섯은 채취시기, 건조방법, 추출용매 또는 추출방법의 차이에 따라 추출되는 생리활성물질의 종류와 양이 달라지므로 향후 구강세균에 대해 항균효과를 나타내는 싸리버섯의 성분을 분리하고 그 성분에 따른 구강세균의 성장억제효과를 확인하는 연구가 필요하며, 또한 독성검사를 통해 안전성을 검증하는 추가적인 연구가 수반되어야 할 것으로 사료된다.
결 론
본 연구는 싸리버섯을 3종의 용매로 추출하여 최적의 구강세균 활성 관련 용매를 탐색하였으며, 치아우식과 치주질환을 유발하는 구강균주 10종에 대한 싸리버섯 추출물의 항균활성을 조사하여 다음과 같은 결과를 확보하였다.
1.디스크 확산법을 이용하여 아세톤, 에탄올 및 에틸아세테이트 등의 추출용매에 의한 항균활성 조사 결과, 에틸아세테이트로 추출한 싸리버섯 추출물이 10종의 구강균주에 대해서 다른 용매와 비교하였을 때, 상당히 높은 항균활성을 나타낸 반면, 에탄올 추출물은 다소 약한 활성을 보였다. 싸리버섯 에틸아세테이트 추출물의 경우, S. ratti와 A. actinomycetemcomitans 등에서 가장 강한 활성을 확인하였다.
2.싸리버섯 에틸아세테이트 추출물의 MIC 조사 결과, S. aureus와 S. mutans에 대해서 15.00 mg/ml, S. sobrinus와 A. actinomycetemcomitans에 대해서 7.50〜15.00 mg/ml, S. anginosus, S. criceti, S. ratti, S. sanguinis 및 A. viscosus 등에 대해서 7.50 mg/ml로 확인되었으며, 특히 A. israelii에 대해서 가장 낮은 3.75 mg/ml를 나타내었다.
3.싸리버섯 에틸아세테이트 추출물을 대상으로 농도 및 시간 경과에 따른 생육저해효과를 확인한 결과, 대부분 음성대조군에 비해 균의 생육저해효과를 나타냈으며, 대부분 12 혹은 24 시간 경과 후 균의 생육이 크게 증가하였으나, 농도가 가장 큰 15.00 mg/ml의 경우 배양 초기부터 36시간까지 강하게 균의 생육이 억제되었다.
위와 같이 결과적으로 싸리버섯 추출물은 S. mutans, S. aureus, S. sanguinis, S. sobrinus, S. anginosus, S. ratti, S. criceti, A. actinomycetemcomitans, A. viscosus 및 A. israelii 등 10종의 구강세균에 대하여 항균효과가 있음을 확인함으로써 치아우식증과 치주염 등의 구강질환에 효과적인 천연 항균소재로서 활용될 수 있으리라 생각한다.
